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干細胞治療致盲性眼病有了新希望

日期: 2019-08-01
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第二看臺

老年性黃斑變性(AMD)、視網膜色素變性(RP)等視網膜變性疾病是目前尚無有效治療手段的兇險致盲性眼病,也是公認的 “視力殺手”。由中南大學愛爾眼科學院院長唐仕波教授、愛爾眼科研究所副所長陳建蘇教授帶領團隊,利用誘導多能干細胞(iPS)條件培養基和飛秒角膜透鏡,聯合構建高活性視網膜色素上皮細胞(RPE)的研究,不但有利于對視網膜色素上皮細胞生理特性、藥物篩選等研究,還有利于構建組織工程視網膜層及其移植。這將幫助科學家開發出應用組織工程 RPE 細胞片治療視網膜變性疾病和光感受器病變的新方法。

培養高活性的視網膜細胞

與年齡相關的老年性黃斑變性是發達國家 50 歲以上人群視力損害和致盲的首要病因,多達 90% 的病人無法治愈。數據顯示,發達國家年齡 50 歲以上黃斑變性的發病率達 11%,目前我國的發病率接近發達國家,患病人數超過 3000 萬人,并以每年 30 萬人次的速度增加,成為我國現階段 50 歲以上年齡群體發病率最高的三大眼科疾病之一,而且女性呈現出比男性更高的危險性。

研究發現,未來最有希望治療老年性黃斑變性的方式是視網膜色素上皮細胞療法、視網膜黃斑部分的移植。那么,要采用 RPE 療法,就需要先培養健康的視網膜細胞。

陳建蘇告訴科技日報記者,取出死亡時間在 3 小時內捐獻者的帶有部分脈絡膜的視網膜組織,在解剖顯微鏡下可將帶有部分脈絡膜的 RPE 層從捐贈組織中分離出來,并培養出 RPE 細胞?!氨狙芯客ㄟ^半定量蛋白芯片分析鑒定,發現了包括血小板衍生生長因子 AA(PDGF-AA)、胰島素樣生長因子結合蛋白 2(IGFBP-2)等因子,在誘導多能干細胞上清液中,含量顯著增高,從而獲得大量增殖能力強、高活性及具有良好功能的 RPE 細胞?!?/span>

獲得類似視網膜自然結構的片狀組織

正常眼內的 RPE 細胞,是緊密連接的單層細胞,只有移植單層 RPE 細胞才有可能提高其存活率并發揮功能?;谶@個原因,研究團隊開始利用組織工程的方式,嘗試體外構建具有功能的 RPE 細胞片。

基因整合是指把兩個非同源基因連接起來。愛爾眼科團隊針對視網膜變性疾病展開進一步的研究,從患者的尿液、血液提取體細胞,進行體外擴增培養,并通過非基因整合型的方式進行重編程轉化,將患者的尿液、血液來源的細胞逆轉為具有自我復制及分化能力的誘導多能干細胞。

“通過研究,對轉化成功的尿液、血液來源的誘導多能干細胞,進行傳代純化并通過多能性基因表達、干性蛋白標志物免疫熒光及體外擬胚體試驗等方法進行鑒定,確認產生的誘導多能干細胞具有多向分化的能力?!?愛爾眼科學院助理研究員顧佳寧說,后續通過 3D 分化培養方式,用不同的培養基對誘導多能干細胞進行視網膜方向的定向誘導分化,獲得視網膜器官發育的類似組織。并對其中出現色素表達的細胞,進行分離培養,得到 RPE 細胞,通過培養形成一層超薄的類似視網膜自然結構的片狀組織。

“但目前尿液及血液細胞的各種重編程方法效率均不高,往往要觀察半個月以上,才能確定是否重編程成功。因此,獲得患者體細胞來源的 iPS 細胞并不容易?!?陳建蘇解釋說,對 iPS 細胞的誘導分化存在多種影響因素,如初始細胞的密度及 iPS 細胞狀態等。因此,通過 iPS 細胞誘導分化得到的 RPE 細胞色素表達情況不穩定,還需進一步控制各個變量,獲得穩定分化成優質 RPE 細胞的誘導方法。

變角膜透鏡為支架材料

一個成功的 RPE 細胞片應具備三要素,即種子細胞、培養系統和支架材料。除了高活性的種子細胞外,支架材料可有效保證細胞的黏附性,以及在移植時可確保細胞以正確的方向面對光感受器細胞。于是,研究團隊把全飛秒激光近視手術中切下取出的角膜基質透鏡 “變廢為寶”,提高了其再利用價值。研究發現,當 RPE 細胞接種在角膜基質透鏡上,并應用誘導多能干細胞條件培養液培養,可以使 RPE 細胞片具有更多的干細胞特性、完善的纖毛組裝以及成熟功能。

此外,團隊還采用 3D 細胞培養、類器官等新技術,建立眼遺傳病患者疾病細胞模型,探明眼病發病和發展的機制及規律?;诎l病機理分析,對現有藥物做出個體化評估,以及發現新的治療靶點和篩選新藥物,獲得眼遺傳病及其他眼病新的治療方案。

“幾十年來,干細胞一直有望治愈疑難雜癥。該項研究將加速推動更安全的誘導多能干細胞療法的發展,同時,實驗已經證明了該項技術的安全性、有效性,為進行人體臨床試驗提供了充足依據?!?唐仕波說。


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此前的研究發現,與正常血壓的女性相比,高血壓女性患乳腺癌的風險增加了約15%。高水平的G蛋白偶聯受體激酶4 (G-protein coupled receptor kinase 4,GRK4)已經被證明會導致高血壓。而近日在新奧爾良舉行的美國心臟協會高血壓科學會議上發表的這項新研究表明,GRK4蛋白存在于乳腺癌細胞中,但不存在于正常的乳腺細胞中。圖片來源:http://cn.bing.com'癌癥和高血壓有共同的危險因素,'該研究的首席研究員、弗吉尼亞大學醫學院的研究科學家Wei Yue博士說。'我們實驗室之前對GRK4的研究發現,它受一種名為c-Myc的致癌基因調控,這種基因在包括乳腺癌在內的許多癌癥中發揮作用。這讓我們猜測GRK4可能是其中的一個因素。'幾乎一半患有高血壓的成年人是女性。65歲以后,女性比男性更容易患高血壓。懷孕、避孕藥和更年期都會增加患高血壓的風險。如果不及時治療,可...
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